Набор для выделения нуклеиновых кислот из молока "Meta Milk Maxi"

В набор включены все необходимые реагенты для выделения ДНК:
1.    Лизирующий буфер – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
2.    Связывающий буфер – для повышения сорбции НК на магнитных частицах;
3.    Ресуспендирующий буфер – для разрушения конгломерата частиц;
4.    Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
5.    Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
6.    Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
7.    Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
8.    Магнитные частицы – для сорбции НК.

Проведение процедуры выделения ДНК

Лизис
1.    В пробирки объемом 15 мл поместить 3 мл исследуемых проб молока.
2.    Добавить к образцам 1 мл лизирующего буфера и 10 мкл Протеиназы К.
3.    Перемешать пробирки с помощью переворачивания.
4.    Инкубировать пробирки на водяной бане при температуре 56-60℃ в течение 40 минут, периодически перемешивая.
Сорбция НК
1.    Добавить в пробирки 8 мл связывающего буфера и 50 мкл магнитных частиц, перемешать.
2.    Инкубировать пробирки при комнатной температуре в течение 20-30 минут, перемешивая каждые 5 минут, либо установить на вращающийся ротор с минимальной скоростью.
3.    Центрифугировать пробирки в течение 5 минут при макс. об/мин, после чего удалить супернатант.
Ресуспендирование
1.    Добавить к каждому осадку 500 мкл ресуспендирующего буфера и разрушить конгломерат частиц с помощью пипетирования.
2.    Перенести суспензию в новые пробирки объемом 1,5-2 мл.
3.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 5 минут.
4.    Аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
Промывка НК
1.    Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 1.
2.    Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 3 минут, после чего аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
4.    Повторить пункты 1-3.
5.    Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 2.
6.    Повторить пункты 2-3.
7.    Высушить образцы с открытыми крышками в термостате при 56-60℃ в течение 5-10 минут до полного испарения промывочного раствора.
Элюция НК
1.    Добавить в пробирки 40-60 мкл элюирующего буфера.
2.    Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3.    Инкубировать в термостате при температуре 56-60℃ в течение 5 минут, периодически встряхивая.
4.    Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
5.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 3-5 минут.
6.    Аккуратно, не задевая частицы, перенести элюат в новые пробирки.
Опционально: рекомендуется провести дополнительное центрифугирование элюата на максимальной скорости для удаления остаточного количества магнитных частиц.
Полученные растворы нуклеиновых кислот могут храниться до 7 дней при температуре от +2℃ до +4℃ и до двух лет при температуре -20℃. По соотношению показателей поглощения на А260/А280 чистота полученного раствора ДНК соответствует ≥1,7.

Скачать краткую инструкцию "MetaMilkMaxi" (pdf)

Скачать полную инструкцию "MetaMilkMaxi" (pdf)

    

   

вернуться в каталог товаров

Буферы набора «Meta Milk Maxi» могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. В случае наличия осадка при минимальных температурах хранения растворы следует нагреть до комнатной температуры.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.